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    菌液的制備分析

    點(diǎn)擊次數(shù):1459  更新時(shí)間:2017-04-06

    1.費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌原液制備:

    菌液的制備:將合格的傷寒桿菌H菌株接種于普通瓊脂的克氏瓶或大試管內(nèi)37℃孵育18—24小時(shí)。肉眼觀察有無雜菌生長(zhǎng),必要時(shí)作鏡檢。用無菌甲醛生理鹽水洗下菌苔,將洗下液體裝入無菌試管內(nèi),置37℃恒溫箱18—24小時(shí)以殺菌。得到原液。用作無菌試驗(yàn)即將菌液接種于肉湯及瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)4天,無活菌生長(zhǎng)者才可使用。

    菌液的制備:將合格的傷寒桿菌菌株依上法培養(yǎng)后,用無菌0.5%石灰酸鹽水將菌苔洗下,洗液裝入無菌試管置于37℃溫箱中18—24小時(shí)殺菌得原液。經(jīng)檢查無菌時(shí)可以使用(如無傷寒桿菌菌株也可用菌株制備抗原。即用0.5%石灰酸生理鹽水洗下菌液置100℃水浴60分鐘,破壞其H抗原即為O菌液。

    2.費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌應(yīng)用液的制備:

    合格的原液用標(biāo)準(zhǔn)比濁管計(jì)算含菌落數(shù)目后,用生理鹽水稀釋至每毫升含菌10億。是為了應(yīng)用液加入適量甲醛使其為0.25%,制備好的原液及應(yīng)用液均保存在2—10℃冰箱中備用,有效期為1年。

    菌液濃度的計(jì)算及稀釋法:

    菌液的濃度可用標(biāo)準(zhǔn)比濁法來測(cè)定,方法如下:

    (1)分別配制1%硫酸溶液及1%氯化鋇溶液

    (2)取口徑相等質(zhì)地相同的試管10支,依下表所示分別將硫酸及氯化鋇溶液加入,封固管口,費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌注明號(hào)碼備用。

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