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    費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌培養(yǎng)關(guān)鍵環(huán)節(jié)

    點(diǎn)擊次數(shù):893  更新時(shí)間:2017-08-08

    費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌設(shè)備有這幾點(diǎn)功能:有停電防護(hù)裝置和防止培養(yǎng)液倒流裝置。
    做液體菌種的幾大重要環(huán)節(jié):
    1.菌種制作
    液體母種的制作也有較多方法,我一般就是用小木屑加其他營(yíng)養(yǎng)料,用錐形瓶培養(yǎng)。此環(huán)節(jié)比固體菌種培養(yǎng)要更仔細(xì)一些,特別注意細(xì)菌的監(jiān)測(cè),菌種環(huán)節(jié)一定要把握好。
    2.培養(yǎng)液的滅菌環(huán)節(jié)
    此環(huán)節(jié)要嚴(yán)格按照操作規(guī)程,把握好每一步,確保培養(yǎng)液滅菌*。期間注意的是,培養(yǎng)液不能加太滿,否則放氣的時(shí)候,液體從放氣閥沖出。個(gè)人建議在放氣閥上再安裝一個(gè)逆止閥,避免停電。
    3.接種環(huán)節(jié)
    接種環(huán)節(jié)也是很重要的環(huán)節(jié),我們一般是將母種先鉤出來放到另一個(gè)裝有蒸餾水的大錐形瓶中,然后再倒入培養(yǎng)罐。哥哥環(huán)節(jié)必須有大火保護(hù),否則容易感染。
    4.培養(yǎng)環(huán)節(jié)、監(jiān)測(cè)菌種純度(zui重要環(huán)節(jié))
    個(gè)人認(rèn)為此環(huán)節(jié)是液體菌種培養(yǎng)的中心環(huán)節(jié),也是zui重要的環(huán)節(jié)。培養(yǎng)菌種嚴(yán)格按照操作規(guī)程,注意每個(gè)細(xì)節(jié)。
    (1)空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管要一起提前滅菌,建議在空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管間安裝一個(gè)逆止閥,防止培養(yǎng)液倒流,這是很關(guān)鍵的,否則培養(yǎng)時(shí)因?yàn)閮?nèi)外壓力差變化,培養(yǎng)液容易回流。
    (2)監(jiān)測(cè)菌種純度。這一步是至關(guān)重要的環(huán)節(jié),此步驟將直接決定你的成敗,監(jiān)測(cè)不好可能會(huì)導(dǎo)致全軍覆沒。監(jiān)測(cè)菌種純度有以下幾種方法:
    a.看:看培養(yǎng)液是否透明澄清,菌球是否均勻。培養(yǎng)液不能渾濁。用試管或錐形瓶,從下面接出少量液體(注意,一定要在大火焰的保護(hù)下進(jìn)行),觀察菌球是否懸浮,不能在短時(shí)間內(nèi)下沉或上浮。
    b.聞:聞放氣閥處是否有菌絲的純香,不能是其他酒精味、酸味甚至惡臭,要回辨別霉菌和細(xì)菌感染時(shí)不同的氣味。
    c.顯微鏡觀察:顯微鏡觀察一些霉菌的特征,平時(shí)可以將已經(jīng)確定的液體菌拿來觀察練習(xí),借助一些教材,對(duì)比觀察,這是經(jīng)驗(yàn)累積才能確定的,但也是*的。顯微鏡具體使用方法本論壇有介紹。
    d.培養(yǎng)監(jiān)測(cè):這一步是zui簡(jiǎn)單也是zui直觀的,直接反應(yīng)了該菌種是否純凈。具體操作如下:提前做好試管或錐形瓶瓊脂培養(yǎng)基,并提前做好滅菌工作,再用此小錐形瓶或試管,在培養(yǎng)罐的下面放料處,接少量的培養(yǎng)液(這一步兩人操作,一個(gè)人負(fù)責(zé)火焰保護(hù),一個(gè)人負(fù)責(zé)接液體),整個(gè)過程在火焰的保護(hù)下塞上棉塞。傾斜放置,讓部分瓊脂露出培養(yǎng)液。控制溫度,1-2天即可觀察,霉菌和細(xì)菌都可以盡收眼底,如果有感染,費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌罐全體培養(yǎng)液應(yīng)及時(shí)放棄,否則后果很嚴(yán)重。
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    費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌

     

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