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    5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作

    點(diǎn)擊次數(shù):666  更新時(shí)間:2023-01-26
       5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。往預(yù)先包被胎盤(pán)催乳素抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物顯色,在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中試劑盒指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度,計(jì)算樣品濃度。
     
      5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白試劑盒的樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
      液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
     ?。?)血清
      室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
     
      (2)血漿:
      應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
     
     ?。?)尿液:
      用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
     
     ?。?)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
      檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。
     
     ?。?)培養(yǎng)細(xì)胞
      檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度高。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
     
      (6)組織標(biāo)本
      切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS,或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
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