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    細(xì)胞因子如何培養(yǎng)

    點(diǎn)擊次數(shù):226  更新時(shí)間:2025-02-14
    轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子beta(TGF beta)家族的細(xì)胞因子無處不在,具有多種功能,對(duì)生存至關(guān)重要。它們?cè)谏L(zhǎng)、發(fā)育、炎癥、修復(fù)和宿主免疫中發(fā)揮著核心作用。哺乳動(dòng)物的TGF beta異構(gòu)體(TGF beta 1、beta 2 和 beta 3)作為潛在的前體分泌,擁有多種細(xì)胞表面受體,并產(chǎn)生至少兩種介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的受體。
    實(shí)驗(yàn)步驟:
    1.細(xì)胞培養(yǎng)
    (以6孔板為參考,其他培養(yǎng)孔可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。)每孔1x10^5-3x10^6細(xì)胞接種于6孔板中,培養(yǎng)至正常生長(zhǎng)階段。
    注:細(xì)胞接種量,可根據(jù)細(xì)胞大小、生長(zhǎng)速度、以及實(shí)驗(yàn)處理周期等調(diào)整。
    2.細(xì)胞干預(yù)或者處理
    (選做)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行藥物或者其他刺激干預(yù)處理。
    3.細(xì)胞共孵育培養(yǎng)
    根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用細(xì)胞培養(yǎng)基按比例稀釋溶液,或者按比例在孔板培養(yǎng)液中加入適量的溶液與細(xì)胞共同孵育,同時(shí)設(shè)置不添加組作為陰性對(duì)照組。每孔加入配制的稀釋后的培養(yǎng)液共同孵育2h,去除舊培養(yǎng)液。
    更簡(jiǎn)單:無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)僅需要幾分鐘。
    更靈敏:無需抗體,檢測(cè)染料僅BrdU抗體的1/500,很容易擴(kuò)散,即便是單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)。
    更快速:無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期僅需2.5小時(shí)。
    更準(zhǔn)確:無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整。
    更兼容:對(duì)樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。
     
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