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    兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒操作步驟

    點(diǎn)擊次數(shù):544  更新時(shí)間:2023-03-15

    兔色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒操作步驟:


    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

    2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    7. 溫育:操作同3。

    8. 洗滌:操作同5。

    9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

     蟲草素 英文名稱:CordycepsCAS號(hào):73-03-0分子式:251.24

     補(bǔ)骨脂酚英文名稱:BakuchiolCAS號(hào):10309-37-2分子式:256.38

     補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚英文名稱:Buguzhi two hydrogen flavone etherCAS號(hào):分子式:338.397

     補(bǔ)骨脂二氫黃酮英文名稱:Psoralen two flavanonesCAS號(hào):分子式:

     補(bǔ)骨脂定英文名稱:PsoralidinCAS號(hào):18642-23-4分子式:

     龍腦英文名稱:BorneolCAS號(hào):507-70-0分子式:154.25

     表沒食子兒茶素英文名稱:EpigallocatechinCAS號(hào):970-74-1分子式:306.27

    表白樺脂酸英文名稱:Betulinic acid.CAS號(hào):38736-77-5分子式:

     百秋里醇英文名稱:Patchouli alcoholCAS號(hào):分子式:

     1,8-桉葉素英文名稱:1,8- EucalyptusCAS號(hào):470-82-6分子式:154.25

     雷公藤內(nèi)酯甲英文名稱:, aCAS號(hào):84104-71-2分子式:454.68

     13-乙?;?9-羥基巴卡丁III英文名稱:13- acetyl -9- hydroxy Chiba kart IIICAS號(hào):142203-65-4分子式:630.67938

     亞麻木酚素英文名稱:Flax phenolCAS號(hào):148244-82-0分子式:686.71

     延胡索乙素英文名稱:TetrahydropalmatineCAS號(hào):2934-97-6分子式:355.4275


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